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普林斯頓 新的RNA合成催化劑——BMT
產品型號:NC-0101-01,18mmol
產品代碼:
產品價格:
折 扣 率: 0
最后更新:2017-06-12
關 注 度:3072
生產企業(yè):深圳市國泰宜豐科技有限公司
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產品詳細介紹 新的RNA合成催化劑——BMT

 
更快速地合成RNA
  
RNA的寡核苷酸的化學合成不如DNA的合成效率高。與脫氧核糖磷酰胺相比,核糖磷酰胺在合成的時候需要多保護一個2’-羥基的步驟。
比較常用的2’-O保護磷酰胺單體包括2'-O-(tert-butyl)-dimethylsilyl (2'-O-叔丁基二甲基硅烷基,(TBDMS)2'-O-[(triisopropyl-silyl)oxy]- methyl (2'-O –三異丙基硅氧基甲基,TOM)。2’位置上的功能基團會在空間上影響到連接反應。
改良RNA連接反應的方法包括用另一種活潑的催化試劑代替1H-四唑(1H-tetrazole)。這些替代的催化劑包括4,5-Dicyanoimidazole (二氰基咪唑,DCI)和 5-ethylthio-1Htetrazole (乙硫基四唑,ETT),但得到的效果并不是很好。


一種新的RNA催化劑
使用新的RNA催化劑5-(benzylmercapto) -1H-tetrazole (芐硫基四唑,BMT)使RNA合成的成本、時間和產量得到了很好的改善。

減少連接的時間 在標準的 1H-tetrazole催化作用下TBDMS或 TOM 的連接時間需要 12-15 分鐘。然而 BMT可以把連接時間減少至 3分鐘。

提高了連接效率
 BMT能夠在保證沒有錯接的情況下使連接效率達到99%。而1H-tetrazole最高的連接效率為97%。
 
提高了產物產量
BMT能夠在合成過程中得到10%的41堿基的寡核苷酸,而使用1H-tetrazole是不可能得到這樣長的寡核苷酸(參見HPLC相關內容)。合成21堿基的寡核苷酸時BMT的產量是1Htetrazole的四倍多。


寡核苷酸合成產量
 
 
RNA合成催化劑         全長產物(bps)          全長產量(%)
Tetrazole                        21                              8
  BMT                             21                              34
Tetrazole                       42                              0 
BMT                              42                              10


 
21mer Mass by ESI MS(質譜)
 
 
RNA合成催化劑                        理論質量Da              實際質量Da
  Tetrazole                                  6689.55                  6689.2
   BMT                                          6689.55                  6690


 
減少了酰胺的消耗
BMT有效地合成RNA時比1H-tetrazol要少消耗50%TBDMS或TOM單體。
減少了持續(xù)的時間
BMT低溫時溶解度也很高。18℃以下不會形成結晶或堵住管道。這就減少了合成所需的時間。
有效地合成DNA
利用BMT成批合成DNA時連接效率要高5倍,合成帶有空間構象要求的修飾DNA*時連接效率比1Htetrazole高出3倍。


修飾的12mer的連接效率 
Activator         Coupling Efficiency 
Tetrazole                 30%  
 BMT                        86% 

 
流程簡單靈活
 
 
     BMT可以很方便地用于自動化合成系統(tǒng)中,除了作為催化劑的替代品外沒有其它的流程變化。 催化劑既可以用于DNA合成也可以用于RNA合成,兩種合成交換時不需要改變催化劑。 BMT的工作液為0.25M乙腈溶液(100倍儲液),使用的體積為400μL,磷酰胺:固相核苷比為8:1。
安全性好
     BMT可以在干燥環(huán)境中運輸和儲存,而U.S. DOT已經把1H-tetrazole列為易爆物品。
 
定購:
     BMT的包裝便利,可直接用于自動化合成。 請來電致我們的客戶或技術服務部門定購或者獲得更多的技術


目錄編號               數量(g)             數量(mmol) 
NC-0101-01          1.75                   9 
NC-0101-03          3.50                 18 
NC-0101-17          17.30                 90 
NC-0101-34         34.60                180 
NC-0101-100       100.00              520 
NC-0101-500       500.00             2600

 
深圳市國泰宜豐科技有限公司
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加入時間:2017-01-11
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