修飾ASP-N蛋白內(nèi)切酶（莓實假胞菌，突變體
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產(chǎn)品型號：EN-171，2pcs
產(chǎn)品代碼：
產(chǎn)品價格：
折 扣 率： 0
最后更新：2017-06-12
關(guān) 注 度：2822
生產(chǎn)企業(yè)：深圳市國泰宜豐科技有限公司
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產(chǎn)品詳細介紹 修飾ASP-N蛋白內(nèi)切酶（莓實假胞菌，突變體）ASPARTIC-N
獨特的修飾方法
1 最小自分解產(chǎn)物
（在pH8.0，30°C條件下的自分解小于5%）
2 改善酶的穩(wěn)定性
活力保持：
在30 C, pH 8.0 條件下孵育6小時，仍保持80-90%活力
在30 C, pH 8.0 條件下孵育24小時，仍保持65-75%活力
Princeton Separations提供測序級修飾Asp-N：
3 在各批次重復性消化反應中，酶活力水平保持一致
4 高特異性，不受其它已知肽鏈內(nèi)切酶的影響
5 每一包裝帶有分析證書以保證質(zhì)量
6 低水平的自分解防止靶肽模糊不清
7 24小時的穩(wěn)定性支持高性能電子噴霧ElectroSpray、微量噴霧MicroSpray、Nanolock噴霧NanoLockSpray等操作的晝夜連續(xù)進行。
Princeton Separations公司測序級肽鏈內(nèi)切酶是高度純化的酶，通過化學修飾，降低了酶的自裂解，增加了酶的穩(wěn)定性。由于在超長的消化期間酶持續(xù)保持活性，因此可以極好地控制蛋白裂解反應。
特性
Asp-N內(nèi)切蛋白酶是一種金屬酶，從脆假單胞菌的一個突變種中提出。該酶特異性地水解天冬氨酸和半胱磺酸N-末端的肽鍵，最佳活性反應條件在pH6.5-8.0。其分子量為27KD 。
化學修飾
Princeton Separations測序級Asp-N經(jīng)過充分地純化，去除污染的蛋白酶，避免影響消化的特異性。使用Princeton Separations開發(fā)的一種方法將高純度酶制品進行化學修飾。這種修飾使酶呈現(xiàn)出自分解抗性和穩(wěn)定的酶活性。該修飾酶在30°C反應緩沖液中孵育6小時，其活性仍保持至少80-90%的酶活性，在同樣條件下孵育24小時，仍保持65-75%的活性。蛋白和酶以1:100比率進行過夜消化反應，可以完全裂解絕大多數(shù)的蛋白。
質(zhì)量控制
以酪蛋白為底物所進行的蛋白消化反應用來檢測修飾酶的蛋白酶活性。修飾酶蛋白酶活性通常與Trypsin的蛋白酶活性進行比較。
制備
每只小瓶裝有修飾Asp-N內(nèi)切蛋白酶干粉3μg，用60μl去離子水或是你所選用的緩沖液溶解，使蛋白酶濃度為0.05μg/μl。
應用
對于蛋白裂解，將酶與蛋白以1：50或1：100比值溶于標準的消化緩沖液（如：50mM Tris-cl，pH8.0；或是50mM磷酸鈉，pH8.0；或是50mM碳酸氫胺）中，25 – 30°C 孵育2-6小時，如果需要，可延長到24小時。過夜孵育以1：100比值為佳，此反應條件適合于大多數(shù)蛋白。
儲存
未開包裝儲存于2 – 8°C，去離子水溶解之后，可在-10°C to -20°C儲存3個月 在變性劑尿素中的穩(wěn)定性 如果蛋白難于溶解，在消化步驟開始之前，可以在消化液中加入尿素。下面表格中所例舉的數(shù)據(jù)，表明變性劑尿素對修飾Asp-N內(nèi)切蛋白酶酶活性的影響。
尿素濃度 活性控制（%）
無 100%
1.0M 100%
2.0M 100%
4.0M 100%
因為鹽酸胍嚴重抑制Asp-N的活性，所以不能用其溶解蛋白。
訂貨信息：
產(chǎn)品目錄
產(chǎn)品說明
EN-171
Aspartic-N 2 x 5 ug vials
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| 加入時間：2017-01-11
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